أربع طرق للكشف عن تلوث الميكوبلازما في مصانع الخلايا

يعد تلوث الميكوبلازما مشكلة شائعة جدًا عند زراعة الخلايا في cell plants . على عكس الملوثات الأخرى ، لا تصبح الخلايا الملوثة بالميكوبلازما عكرة بشكل عام ، لذلك من الصعب الحكم بالعين المجردة. هناك أربع طرق لتحديد ما إذا كانت الخلايا ملوثة بالميكوبلازما:

1. تلطيخ مضان الحمض النووي

تعتمد طريقة التلوين الفلوري للحمض النووي على مبدأ أن الصبغة الفلورية Hoechst33258 يمكن أن ترتبط بالمنطقة الغنية بقاعدة AT في الحمض النووي للميكوبلازما. النقاط الفلورية هي الحمض النووي للميكوبلازما الغنية في مناطق قاعدة AT

2. تقنية PCR

تم تصميم البادئات المحددة وفقًا للتسلسلات المحفوظة في جينوم الميكوبلازما ، ويتم تضخيم الحمض النووي للعينة المراد اختبارها ، ويتم التشخيص عن طريق تحليل حجم المنتج المضخم. تُستخدم تقنية الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل للكشف عن تلوث الميكوبلازما ، بدورة قصيرة ، وحساسية عالية ، ونوعية جيدة ، وعملية بسيطة ، ويمكنها الكشف عن عدد كبير من العينات في وقت واحد.

3. مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)

ELISA يستخدم في الكشف عن تلوث الميكوبلازما ، مع خصوصية وحساسية جيدين ، ويمكن أن يكمل الكشف عن عدد كبير من العينات في وقت واحد. يتميز بخصائص الاكتشاف النوعي البسيط والسريع والكمي.

4. المجهر الإلكتروني

بشكل عام ، تتم زراعة الخلايا في مصانع الخلايا لمدة 48 إلى 72 ساعة. قبل أن تتكدس الخلايا تقريبًا ، يتم هضم الخلايا باستخدام التربسين لعمل تعليق خلوي ، وثابت ، ومدمج ، ومقطع إلى شرائح قبل الملاحظة. في الوقت الحاضر ، هناك أكثر من 20 نوعًا من الميكوبلازما معروف أنها تلوث الخلايا ، وأكثر من 95٪ منها عبارة عن ميكوبلازما فموية ، لذلك يجب على المشغلين الانتباه إلى العملية المعقمة عند زراعة الخلايا.

The above are four commonly used detection methods when detecting mycoplasma contamination in cell factories. At present, there are more than 20 kinds of mycoplasma known to contaminate cells, of which more than 95% are oral mycoplasma, so operators should pay attention to aseptic operation when culturing cells.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.