Как использовать колбы с клеточными культурами для обнаружения колоний кишечной палочки

Wed May 18 17:32:40 CST 2022

Колиформные бактерии относятся к группе грамотрицательных небациллярных бактерий, которые могут ферментировать лактозу, продуцировать кислоту и газ, аэробные и факультативно-анаэробные. В практических приложениях он часто используется в качестве индикатора того, загрязнена ли пища фекалиями. Среди всех методов обнаружения использование колбы для клеточных культур для обнаружения является наиболее распространенным. Этапы операции следующие:

1. Отбор проб и разбавление

(1) В соответствии с асептическим методом поместите 25 г (или 25 мл) испытуемого образца в колбу для клеточных культур, содержащую 225 мл стерильной воды (предварительно установите соответствующее количество стеклянных шариков в колбе) или стерилизованную ступку, и тщательно встряхните его. Или измельчить до однородного разведения 1:10. Лучше всего использовать стерильный гомогенизатор для твердых образцов и центрифугу при скорости 800010000 об/мин в течение 1 минуты, чтобы получить разведение 1:10.

(2) Используйте стерильную соломинку объемом 1 мл. отсосать 1мл разведения 1:10, налить в пробирку, содержащую 9мл стерильной воды, встряхнуть и перемешать до разведения 1:100, заменить стерильной соломинкой 1мл, нажать. .

(3) В соответствии с требованиями пищевой гигиены или оценкой загрязнения испытуемых образцов выберите три разведения и засейте 3 пробирки для каждого разведения. Его также можно инокулировать непосредственно с образцом.

2. Тест на начальное брожение лактозы

Это обычно называют гипотетическим тестированием. Его цель — проверить образец на наличие бактерий, ферментирующих лактозу с образованием газа. Исследуемый образец инокулируют в пробирку для ферментации соли желчных кислот с лактозой, пробирку для ферментации соли желчных кислот с двойной лактозой используют для инокулята объемом более 1 мл; одна пробирка для ферментации желчных солей лактозы используется для 1 мл и менее 1 мл. Инокулируйте 3 пробирки для каждого разведения и поместите их в инкубатор при 36 ± 1 ℃ на 24 ± 2 часа. Если все пробирки для ферментации соли желчных кислот с лактозой не выделяют газ, результат можно считать отрицательным на наличие бактерий группы кишечной палочки. Если есть газообразование, следуйте приведенной ниже процедуре.

3. Разделительная культура

Выделяющие газы ферментационные пробирки засевают и инокулируют на чашках с агаром с эозином и метиленовым синим и культивируют в инкубаторе при 36±1°C в течение 18-24 часов. Затем наблюдали за морфологией колоний и проводили окрашивание по Граму, микроскопию и тест на повторную ферментацию.

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4. Тест двойного брожения лактозы

Так называемый подтверждающий тест, целью которого является доказательство того, что грамотрицательные небациллярные бактерии, выделенные из пробирки, которые были положительными в исходном тесте брожения лактозы, действительно могут ферментировать лактозу с образованием газа. На упомянутой выше селективной среде EMB отберите 1–2 подозрительных колонии кишечной палочки для окрашивания по Граму и одновременно инокулируйте пробирки для ферментации лактозы и поместите их в инкубатор при 36 ± 1 ° C на 24 ± 2 часа для наблюдения за газом. производство. . Если в пробирке для ферментации лактозы выделяется газ, а окраска по Граму дает отрицательный результат, бактерии, не содержащие Bacillus, считаются положительными на колиформы; если пробирка для ферментации лактозы не выделяет газ или окрашивание по Граму положительное, то об этом сообщается как об отрицательном для колиформных бактерий. Escherichia coli является важным индикатором, отражающим загрязнение пищевых продуктов. Освоение метода обнаружения — это базовый навык, которым должен обладать каждый пищевой инспектор.

колбы для клеточных культурcell culture flasks to detect E. coli group indicators. Escherichia coli is an important indicator that reflects whether food is contaminated. Mastering the detection method is a basic skill that every food inspector should possess.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.