Как контролировать время переваривания трипсина в колбах для клеточных культур

Wed May 18 17:31:48 CST 2022

Культура клеток включает инокуляцию клеток, культивирование, сбор и другие процессы. Клетки в колбы для клеточных культур выросли до определенной степени, и их необходимо собрать. В это время клетки на стенке колбы необходимо переварить трипсином, а затем собрать. При использовании панкреатина необходимо контролировать время переваривания.

Трипсин представляет собой гетерогенную протеазу, которая может расщеплять белок на клеточной мембране и в колбах для клеточных культур. При деградации белка в определенном месте происходит деградация белка на стыке между белками, и клетки становятся сферическими из-за напряжения их внутреннего цитоскелета, тем самым разделяя клетки. Степень переваривания трипсином является ключевым этапом в клеточной культуре: чрезмерно переваренный клеточный дебрис увеличивается, увеличивается количество черной пены, клетки отпадают на куски, что серьезно влияет на жизнеспособность клеток, а некоторые клетки всплывают и теряются вместе с выброшенным трипсином; пищеварение Недостаточное, клетки трудно сдуть со стенки флакона, повторное пипетирование также повредит жизнеспособности клеток.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

Разные ткани или клетки по-разному реагируют на действие панкреатина. Активность диспергированных клеток панкреатина также связана с его концентрацией, температурой и временем действия. При рН 8,0 и температуре 37 действующая способность раствора панкреатина относительно сильна. При использовании панкреатина следует контролировать концентрацию, температуру и время, чтобы избежать повреждения клеток, вызванного перевариванием. Поскольку Ca2+, Mg2+, сыворотка и белок могут снижать активность панкреатина, при приготовлении раствора панкреатина, такого как раствор D-Хэнкса, следует использовать BSS без Ca2+ и Mg2+. При прекращении пищеварения используйте питательную среду, содержащую сыворотку, или ингибитор трипсина, чтобы остановить действие панкреатина на клетки. время, и наблюдайте, округляются ли клетки каждую минуту, и делайте запись. Короче говоря, при сборе клеток в

необходимо контролировать время переваривания трипсином, чтобы поддерживать жизнеспособность клеток. cell culture flasksколбы для культивирования клеток

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.