Производство вируса гепатита С с высоким титром в масштабируемом биореакторе одноразового использования с высокой плотностью клеток

Wed May 18 17:31:19 CST 2022

2. Материалы и методы

2.1. Поддержание клеток Huh7.5 Клетки

Huh7.5 поддерживали в Т-колбы для клеточных культур в среде, содержащей сыворотку (SCM): модифицированная Дульбекко среда Игла (DMEM) (Gibco, Пейсли, Великобритания), содержащая 4 мМ GlutaMAX и дополненная 10% эмбриональная бычья сыворотка (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США), 100 ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma). В колбах T175 (Nunc, Roskilde, Дания) и трехслойных культуральных колбах (Nunc) клетки Huh7.5 пассировали каждые 2–3 дня. Все клеточные культуры поддерживали при 37 °C и 5% CO2.

2.2. HCV Virus Stocks

В данном исследовании использовали два штамма рекомбинантных SA13/JFH1core-NS5B генотипа 5a [28], выращенных в монослойных культурах клеток Huh7.5 в Т-колбах, с подтвержденной последовательностью. Вирусный штамм третьего пассажа с титром инфекционности 5,8 log10 БОЕ/мл, выращенный в условиях, содержащих сыворотку (SC) [39], использовали для инокуляции культур CelCradle™, культур во встряхиваемых колбах и для экспериментов по характеристике вируса. Вирусный штамм четвертого пассажа с титром инфекционности 5,1 log10 БОЕ/мл [32], выращенный в условиях SF [39], использовали для экспериментов по характеристике вируса.

Источник: https://www.mdpi .com/2076-393X/10/2/249/htm

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.