English
Заражение микоплазмой является очень распространенной проблемой при культивировании клеток в клеточные фабрики. В отличие от других контаминаций, зараженные микоплазмой клетки обычно не мутнеют, поэтому их трудно судить невооруженным глазом. Есть четыре способа определить, заражены ли клетки микоплазмой:
1. Флуоресцентное окрашивание ДНК
Метод флуоресцентного окрашивания ДНК основан на том принципе, что флуоресцентный краситель Hoechst33258 может связываться с богатой основанием АТ областью ДНК микоплазмы. Флуоресцентные точки представляют собой ДНК микоплазмы, богатую участками оснований АТ.
2. Технология ПЦР
Специфические праймеры создаются в соответствии с консервативными последовательностями в геноме микоплазмы, амплифицируется нуклеиновая кислота тестируемого образца, и диагноз ставится путем анализа размера амплифицированного продукта. Технология обнаружения ПЦР используется для обнаружения загрязнения микоплазмой, с коротким циклом, высокой чувствительностью, хорошей специфичностью, простотой в эксплуатации и может обнаруживать большое количество образцов за один раз.
3. Иммуноферментный анализ (ELISA)
ELISA используется для обнаружения заражения микоплазмой с хорошей специфичностью и чувствительностью и может выполнять обнаружение большого количества образцов за один раз. Он имеет характеристики простого, быстрого и количественного качественного обнаружения.
4. Электронный микроскоп
Обычно клетки на клеточных фабриках культивируют от 48 до 72 часов. Прежде чем клетки станут почти сливными, клетки переваривают трипсином для получения клеточной суспензии, фиксируют, заливают и нарезают перед наблюдением.
Выше приведены четыре наиболее часто используемых метода обнаружения при обнаружении загрязнения микоплазмой на клеточных фабриках. В настоящее время известно более 20 видов микоплазм, загрязняющих клетки, из которых более 95% составляют пероральные микоплазмы, поэтому при культивировании клеток операторы должны обращать внимание на асептические операции.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.