Обнаружение активности клеток на клеточных фабриках - метод МТТ

Wed May 18 17:28:57 CST 2022

— это расходный материал, который часто используется для адгезивных клеточных культур. Во время эксперимента нам необходимо отслеживать состояние роста клеток в режиме реального времени и вносить соответствующие коррективы в зависимости от конкретной ситуации. Жизнеспособность клеток можно определить с помощью метода МТТ для определения роста клеток. Метод МТТ, также известный как колориметрический метод МТТ, представляет собой метод определения выживания и роста клеток. Принцип детекции заключается в том, что сукцинатдегидрогеназа в митохондриях живых клеток может восстанавливать экзогенный МТТ до нерастворимого в воде сине-фиолетового кристаллического формазана и откладываться в клетках, в то время как мертвые клетки такой функцией не обладают. Диметилсульфоксид (ДМСО) может растворять формазан в клетках, и показатель его светопоглощения можно измерить с помощью твердофазного иммуноферментного анализа при длине волны 570 нм, что может косвенно отражать количество живых клеток. В пределах определенного диапазона количества клеток количество образовавшихся кристаллов МТТ пропорционально количеству клеток. Этот метод широко используется для обнаружения активности некоторых биологически активных факторов, крупномасштабного скрининга противоопухолевых препаратов, теста на цитотоксичность и анализа радиочувствительности опухоли. Он характеризуется высокой чувствительностью и экономичностью.cell factory

Перед проверкой жизнеспособности клеток на клеточной фабрике очень важным этапом является приготовление МТТ. Обычно концентрация МТТ в этом методе составляет 5 мг/мл. Таким образом, 0,5 г МТТ можно взвесить, растворить в 100 мл фосфатно-солевого буфера (PBS) или среды, не содержащей фенолового красного, профильтровать через фильтр 0,22 мкм для удаления бактерий из раствора и хранить при 4°C в темноте. . . Во время приготовления и хранения постарайтесь обернуть контейнер алюминиевой фольгой.

При использовании метода МТТ для измерения активности клеток на клеточной фабрике следует учитывать, что МТТ является канцерогенным, поэтому будьте осторожны при его использовании. Этот метод можно использовать только для определения относительного количества клеток и относительной жизнеспособности, но не абсолютного количества клеток. При тестировании результатов с помощью устройства для считывания микропланшетов, чтобы обеспечить линейность экспериментальных результатов, поглощение МТТ должно находиться в диапазоне 0-0,7, насколько это возможно.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.