Subcultuur verwijst naar het proces van het verdelen van de cultuur in kleine delen, ze opnieuw te inoculeren in een ander kweekvat (fles) en vervolgens te kweken. Celkweekkolven zijn veelgebruikte verbruiksartikelen bij het kweken van cellen. Dus, hoe de cellen in de kolf te subkweken?
Over het algemeen groeien de cellen in de celkweekkolven uit tot een dichte monolaag en zijn ze in wezen verzadigd. Om de cellen in staat te stellen zich te blijven voortplanten en het aantal cellen uit te breiden, is het noodzakelijk doorgangsoperaties uit te voeren. Gesuspendeerde cellen kunnen direct worden gescheiden, terwijl hechtende cellen moeten worden verteerd voordat ze kunnen worden gescheiden. Over het algemeen worden proteolytische enzymen (zoals trypsine) gebruikt om hechtende cellen te verteren tot enkele cellen. Ethyleendiaminetetraazijnzuur (EDTA) kan ook worden toegevoegd om de spijsvertering te verbeteren. Observeer de cellen totdat de cellen rond worden en loskomen van de fleswand. Dit proces duurt vaak 5-15 minuten. Om celklonters te voorkomen, mag u tijdens het verteren van de cellen niet op de celkweekflessen tikken.
Voor bijzonder moeilijk verteerbare cellen kunt u trypsine-EDTA-ontsluitingsoplossing toevoegen en de cellen op 37°C plaatsen om spijsvertering vergemakkelijken. Nadat de cellen van de fleswand zijn gescheiden, voeg je onmiddellijk een compleet medium met serum toe om de vertering te stoppen. Bepaalde eiwitten in het serum kunnen de alvleesklier remmen. Enzym activiteit. Over het algemeen is centrifugeren niet nodig. Als de cellen een serumvrij medium of medium met een laag serumgehalte nodig hebben, centrifugeer dan gedurende 5 minuten bij 125.000 g, gooi vervolgens het stopgezette medium weg, voeg een geschikt nieuw medium toe en meng de cellen voorzichtig vóór de subcultuur.
De celpassageverhouding is over het algemeen 1:2 -1:20, afhankelijk van het celtype. Tijdens het passeren zal trypsine het celmembraan van sommige cellen beschadigen. U kunt een celschraper gebruiken om de cellen voorzichtig te schrapen, een geschikte hoeveelheid medium toe te voegen, voorzichtig te pipetteren om de cellen te mengen en ze over te brengen naar een nieuwe kweekfles.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.