English
Celkweekflessenzijn veelgebruikte hulpmiddelen voor hechtende celkweek, en celsubkweekoperaties zijn betrokken bij het kweken van cellen. Hoe moeten we hechtende cellen passeren? U kunt deze stappen volgen:
1. Haal de voorverwarmde kweekoplossing eruit: haal de voorverwarmde kweekoplossing eruit, veeg het af met een alcoholkatje voordat je het in de ultraschone bank legt.
2. Haal de cellen uit de incubator: let op dat u de dop van de fles vastdraait wanneer u de cellen uit de celcultuurfles haalt, veeg de microscooptafel af met wattenbolletjes alcohol en observeer vervolgens de cellen onder de microscoop.
3. Zet de cultuurfles in de ultraschone werkbank en open de mond van de fles, en brand tegelijkertijd de mond op de alcohollamp voor desinfectie.
4. Voeg spijsverteringsoplossing toe: zuig voorzichtig de oude kweekoplossing eruit, was (spoel) met PBS, voeg de juiste hoeveelheid spijsverteringsoplossing (trypsine-oplossing) toe, let op de hoeveelheid spijsverteringsoplossing om de cellen te bedekken, en de spijsverteringstemperatuur is 37 ° C.
T75-TC-Treated-Cell-Culture-Flasks
5. De cellen observeren onder een microscoop: Observeer de verteerde cellen onder een omgekeerde microscoop. Als het cytoplasma is teruggetrokken en de cellen niet langer in bladen zijn verbonden, geeft dit aan dat de cellen op dit moment goed worden verteerd.
6. Gooi de trypsine-oplossing weg en voeg vers kweekmedium toe om de reactie te beëindigen. Pipetteer voorzichtig in de celsuspensie.
7. Pipetteer de celsuspensie in een centrifugebuis van 10 ml. Plaats de centrifugebuis na equilibreren in een centrifuge en centrifugeer bij 1000 rpm/min gedurende 5 min.
8. Gooi het supernatant weg, voeg een geschikt volume kweekmedium toe en blaas de cellen zachtjes met een druppelaar om een celsuspensie te maken.
T225-TC-Treated-Cell-Culture-Flasks
9. Zuig de celsuspensie op en verdeel deze over 2 - 3 kweekkolven, voeg de juiste hoeveelheid kweekmedium toe en draai de doppen vast.
10. Cellen observeren onder een microscoop: observeer het aantal cellen onder een omgekeerde microscoop en tel indien nodig. Merk op dat een te lage dichtheid de groei van de gepasseerde cellen zal beïnvloeden, en de dichtheid van de gepasseerde cellen mag niet lager zijn dan 5×105/ml. Maak ten slotte een markering.
11. Doorgaan met kweken: Veeg het kweekflesje af met een alcohol watje, draai de dop goed los en plaats het in een CO2-incubator om verder te kweken. Cellen begonnen zich 2 - 4 uur na passage aan de kolfwand te hechten.
De celpassage in de celkweekfles omvat de vertering van de cellen. We moeten aandacht besteden aan het beheersen van de verteringstijd om schade aan de cellen als gevolg van overmatige vertering te voorkomen.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.