English
Celcultuur is een zeer moeilijke taak en elke nalatigheid in de kleine details van de operatie kan leiden tot het mislukken van het experiment. Celkweekflessen zijn een soort kweekcontainers die vaak worden gebruikt, dus wat is het basisproces?
Let allereerst op steriliteit. Ongeacht welke tube vloeistof, probeer na opening de deksel zo snel mogelijk te sluiten en de deksel naar boven te doen. Ga tijdens het hanteren niet over open containers. Daarnaast kun je op de steriele tafel het beste van alles in een rij zetten, evenwijdig aan jezelf. Probeer niet van voren naar achteren te overlappen.
Alle verbruikbare reagentia die bij celmanipulatie worden gebruikt, zijn bij voorkeur celcultuurspecifiek. Over het algemeen zijn de meeste verbruiksartikelen voor eenmalig gebruik.
(1) Celvervanging:
Verwijder het originele kweekmedium uit de kweekschaal/fles met een pipet of een pipet en voeg een nieuw kweekmedium toe.
FuDau T75 Celkweekkolven
(2) Celpassage:
Controleer voor het passeren of de cellen compact zijn en of ze beginnen te fuseren. Over het algemeen, wanneer de fusie 70-80% bereikt, kan deze worden gepasseerd. Het kan ook eerder worden doorgegeven.
Bij aanhangende cellen:
1) Verwijder de originele kweekoplossing uit de petrischaal/fles met een pipetpunt of een pipet;
2) Wassen met steriele PBS of steriele zoutoplossing gedurende 3 keer (volgens het kweekvolume);
3) Voeg een geschikte hoeveelheid trypsine toe om gedurende een geschikte tijd te verteren (meestal 0,25% trypsine; kweekschaal van 9 cm/10 cm en kweekfles van 25 cm, voeg 1 ml toe trypsine per keer. De verteringstijd is afhankelijk van het celtype en andere omstandigheden. In het algemeen, als het een cellijn, niet-primaire cultuur is, is vertering gedurende 1-2 minuten voldoende);
4) Pipetteer tientallen keren met de punt van de pipet (afhankelijk van het celtype. Over het algemeen is de cellijn 30-50 keer, en het duurt meestal ongeveer 2 minuten);
5) Voeg een geschikt volume volledig medium toe om trypsinisatie te stoppen (indien het is een kweekschaal van 9 cm/10 cm en een kweekfles van 25 cm, je kunt 1 ml compleet medium toevoegen, nu zit er 2 ml oplossing in de kweekfles (schaal)).
6 ) De oplossing kan nu in flacons (2 ml) worden verdeeld. Als het een cellijn is, verdeel deze dan direct over twee kweekflessen (schaaltjes). In het geval van primaire kweek kunnen de cellen worden gescheiden volgens de verteringstijd; daarom kan de oplossing (2 ml) worden overgebracht naar een nieuwe kweekfles (schaal).
FuDau T225 Celcultuurkolven
7) Vul twee kweekflessen (schalen) aan met volledig kweekmedium tot normaal volume (indien een kweekschaal van 9 cm/10 cm en een kweekfles van 25 cm, dit is 5 ml compleet kweekmedium)
8) Observeer onder de microscoop. De cellen die zojuist zijn gepasseerd, hebben zich niet aan de wand gehecht, zijn in de oplossing gesuspendeerd en zijn rond. Over het algemeen zal het binnen 2 uur aan de muur hechten. Als het al aan de muur is gehecht, zal het verschillende vormen hebben afhankelijk van het celtype, maar meestal is het niet rond.
9) Nadat de waarneming onder de microscoop correct is, plaatst u het in de celkweekincubator. Voordat u de kweekfles (schaal) erin zet, kunt u deze afnemen met desinfecterende alcohol.
10) Na subcultuur kunt u het celmedium het beste de volgende dag een keer vervangen. Het kan natuurlijk ook van de situatie afhangen.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.