English
Als economisch en betaalbaar hulpmiddel voor celkweek heeft de erlenmeyer shake flask een breed scala aan toepassingen op het gebied van biofarmaceutica, vaccinbereiding, cel- en gentherapie, enz. Onder andere wordt dit soort container ook gebruikt bij lentivirustransfectie.
Lentivirale vectoren zijn gentherapievectoren ontwikkeld op basis van HIV-1. Anders dan algemene retrovirale vectoren, heeft het het vermogen om zowel delende als niet-delende cellen te infecteren, en wordt het veel gebruikt in de studie van het tot expressie brengen van RNAi. De celschudkolf wordt voornamelijk gebruikt bij het experiment van lentivirustransfectie van suspensiecellen. De stappen zijn als volgt:
125ml-Erlenmeyer-Shake-Flasks
1. Voeg polybreen toe tot 6 μg/ml en een geschikte hoeveelheid virus tot 2 × 105/ml gesuspendeerde cellen, en meng goed. Incubeer bij 37°C. Of centrifugeer bij kamertemperatuur bij 150 g gedurende 4 uur (geselecteerd, deze stap kan de transfectie-efficiëntie verbeteren voor sommige moeilijk te transfecteren cellijnen).
2. (Geselecteerd voor deze stap voor cellen die gevoelig zijn voor polybrene-toxiciteit) Voeg een gelijk volume vers medium toe na 4 uur (of na centrifugeren) om polybreen te verdunnen.
1000ml-Erlenmeyer-Shake-Flasks
3. Blijf 3-4 dagen cultiveren. De groei van intermediaire cellen kan worden gepasseerd of het medium kan worden gewijzigd.
Wanneer u een erlenmeyer-schudfles gebruikt voor lentivirale transfectie, zorg er dan voor dat u zo min mogelijk medium gebruikt tijdens infectie; het toevoegen van 5-10ul Polybrene (de concentratie van de voorraadoplossing is 2mg/ml) per 1ml medium kan de efficiëntie met ongeveer 3-5 keer verbeteren. Het probleem van de efficiëntie van virusinfecties is echter relatief en u kunt uw eigen onderzoeksdoeleinden bereiken.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.