nieuws

Toepassing van celkweekplaat bij MTT-detectie

Tue Dec 06 20:51:19 CST 2022

De celkweekplaatis een soort biologisch hulpmiddel. Het is verdeeld in platte bodem en ronde bodem volgens de vorm. Het aantal putjes omvat 6 putjes, 12 putjes, 24 putjes, 48 ​​​​putjes, 96 putjes, 384 putjes, enz. Het wordt voornamelijk gebruikt voor celkweek en kan ook worden gebruikt om te meten eiwitconcentratie, worden platen met 96 putjes vaak gebruikt voor MTT-detectie.

MTT-methode, ook bekend als MTT-colorimetrische methode, is een methode voor het detecteren van celoverleving en -groei. Het detectieprincipe is dat het succinaatdehydrogenase in de mitochondriën van levende cellen het exogene MTT kan reduceren tot in water onoplosbaar blauwpaars kristalvormig formazan (Formazan) en het in de cellen kan afzetten, terwijl dode cellen die functie niet hebben. Dimethylsulfoxide (DMSO) kan formazan in cellen oplossen en de lichtabsorptiewaarde wordt gemeten bij 570 nm met een enzymgekoppelde immunoassay, die indirect het aantal levende cellen kan weergeven. Binnen een bepaald bereik van celaantallen is de hoeveelheid MTT-kristalvorming evenredig met het aantal cellen. De detectiestappen zijn als volgt:

1. Kweek de cellen in een Celkweekplaat met 96 putjes. Nadat de celdichtheid geschikt is, voegt u 50 µl MTT toe aan elk putje en gaat u door met kweken gedurende 4 uur;

2. Zuig het kweekmedium met MTT weg en voeg 150ul DMSO toe. Tril horizontaal gedurende 10 minuten om de kristallen volledig op te lossen. Voor gesuspendeerde cellen, na centrifugeren, het medium wegzuigen en vervolgens DMSO toevoegen om op te lossen;

3. Meet de absorptie bij 550 nm op het enzym-gekoppelde immunoassay-instrument (stel een redelijke controlegroep en blanco groep in);

4. Celoverlevingspercentage = absorptiewaarde van experimentele groep / absorptiewaarde van controlegroep * 100%.

Tijdens de operatie moet worden opgemerkt dat MTT kankerverwekkend is. Probeer indien mogelijk het soort transparante filmhandschoenen te dragen. De bereide MTT moet steriel zijn. MTT is erg gevoelig voor bacteriën. Het maakt niet uit of u de celkweekplaat met 96 putjes toevoegt zonder deze tegen licht te beschermen. , De tijd is tenslotte kort, of u kunt de verlichting op de console uitschakelen.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.