세포 배양 플라스크에서 트립신의 소화 시간을 제어하는 ​​방법

Wed May 18 17:03:06 CST 2022

세포 배양에는 세포 접종, 배양, 수확 및 기타 과정이 포함됩니다. cell culture flasks의 세포가 어느 정도 성장했으며 세포를 수확해야 합니다. 이때, 플라스크 벽에 있는 세포를 트립신으로 소화한 후 수확해야 합니다. Pancreatin을 사용하는 동안 소화 시간을 조절해야 합니다.

Trypsin은 세포막과 세포 배양 플라스크의 단백질을 분해할 수 있는 이종 프로테아제입니다. 특정 위치에서 단백질을 분해함으로써 단백질 사이의 접합부에 있는 단백질이 분해되고, 세포 내부의 세포골격의 장력으로 인해 세포가 구형이 되어 세포가 분리된다. 트립신 소화의 정도는 세포 배양의 핵심 단계입니다. 과도하게 소화된 세포 파편이 증가하고, 검은 찌꺼기가 증가하고, 세포가 조각으로 떨어져서 세포 생존에 심각한 영향을 미치고, 일부 세포는 버려진 트립신과 함께 떠다니고 잃습니다. 소화 불충분, 세포가 병 벽에서 날아가기 어렵습니다. 반복되는 파이펫팅은 세포 생존력도 손상시킵니다.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

다른 조직이나 세포는 판크레아틴의 작용에 다르게 반응합니다. 판크레아틴에 분산된 세포의 활성은 농도, 온도 및 작용 시간과도 관련이 있습니다. pH가 8.0이고 온도가 37일 때 판크레아틴 용액의 작용력은 비교적 강하다. 판크레아틴을 사용할 때 과소화로 인한 세포 손상을 피하기 위해 농도, 온도 및 시간을 조절해야 합니다. Ca2+, Mg2+, 혈청 및 단백질은 pancreatin의 활성을 감소시킬 수 있으므로 D-Hanks 용액과 같은 pancreatin 용액을 제조할 때 Ca2+ 및 Mg2+가 없는 BSS를 사용해야 합니다. 소화종료시에는 혈청이 함유된 배양배지나 트립신억제제를 사용하여 판크레아틴이 세포에 미치는 영향을 막는다.

또한, 새로 구입한 세포라면 저농도의 트립신을 먼저 사용하여 소화여부를 알 수 있다. 시간, 그리고 세포가 1분마다 둥근지 관찰하고 기록합니다. 요컨대 세포 배양 플라스크에서 세포를 수확할 때 세포 생존력을 유지하기 위해 트립신 소화 시간을 제어해야 합니다.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.