動的モデルを使用した懸濁液MDCK細胞の増殖と代謝に対するインフルエンザAウイルス感染の影響

Wed May 18 17:17:52 CST 2022

材料と方法

3.1。 Shake Flask Cultivations

MDCK.SUS2浮遊細胞の前培養は、シェーカーフラスコ(125 mLポリカーボネート三角フラスコ、#431143、Corning®、ニューヨーク市、ニューヨーク、米国)で50 mLの作業容量(wv)で培養しました。 、Multitron Proインキュベーター(Infors HT、ボットミンゲン、スイス)で、37°C​​、5%CO2雰囲気、180rpmの振とう周波数。細胞は、0.5〜0.8×106細胞/mLの播種密度で3〜4日ごとに継代されました。

IAV A/プエルトリコ/8/34(H1N1)シードウイルスが感染に使用され、生成されました付着性MDCK細胞(ECACC#84121903)。シードウイルスの力価は1.1×109TCID50/mLでした。

細胞は、化学的に定義された、タンパク質および動物成分を含まない培地Smif8(Smif8 PGD 2x、5 mMグルタミンを添加、および8懸濁液MDCK細胞の培養用に特別に開発されたmMピルビン酸)[95]。

モデル検証のための増殖および感染実験は、500 mL振とうフラスコ(#4113-0500、Nalgene™、Thermo Scientific、マサチューセッツ州ウォルサム、 USA)150rpmで200mLの初期培養量で。 2つの培養を行った。1つは細胞が約200時間増殖する模擬感染(培養1)、もう1つは接種後約49時間で細胞がIAVに感染する感染(培養2)である。細胞集団の同時感染を達成するために、moi=10が使用されました。感染時の細胞濃度が比較的低く(2.1×106細胞/ mL)、moiが高いため、培地の交換やトリプシンの添加(ウイルス活性化)は必要ありませんでした。どちらの培養でも、実験は非水和インキュベーターで行われたため、サンプリング前に滅菌Milli-Q水を追加して、水分蒸発(1〜2 mL /日)を補正しました。

出典: https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.