細胞培養フラスコを使用して大腸菌コロニーを検出する方法

Wed May 18 17:17:45 CST 2022

大腸菌群とは、乳糖を発酵させ、酸とガスを生成し、好気性および通性嫌気性菌を生成するグラム陰性の非バチルス菌のグループを指します。実際のアプリケーションでは、食品が糞便で汚染されているかどうかの指標としてよく使用されます。すべての検出方法の中で、検出に細胞培養フラスコを使用するのがより一般的に使用される方法です。操作手順は次のとおりです。

1。サンプリングと希釈

(1)無菌法に従って、25g(または25mL)の試験サンプルを225mLの滅菌水(フラスコ内に適切な数のガラスビーズをあらかじめ設定)または滅菌した乳鉢を含む細胞培養フラスコに入れます。よく振ってください。または、1:10に均一に希釈するように粉砕します。固形サンプルには滅菌ホモジナイザーを使用し、8000 10000r / minの速度で1分間遠心分離して、1:10に希釈するのが最適です。

(2)1mLの滅菌ストローを使用します。 1Mlの1:10希釈液を吸引するには、9mLの滅菌水が入っているテストチューブに注ぎ、振とうして混合して1:100希釈液にし、1mLの滅菌ストローと交換し、プレスします。上記の操作を10回連続希釈します。 。

(3)食品衛生要件またはテストサンプルの汚染の推定に従って、3つの希釈液を選択し、各希釈液に3本のチューブを接種します。サンプルを直接接種することもできます。

2。乳糖の初期発酵試験

これは一般に仮説検定と呼ばれます。その目的は、乳糖を発酵させてガスを生成するバクテリアがないかサンプルをチェックすることです。試験するサンプルをラクトース胆汁酸塩発酵チューブに接種し、ダブルラクトース胆汁酸塩発酵チューブを1mL以上の接種に使用します。単一の乳糖胆汁酸塩発酵チューブは、1mLおよび1mL未満に使用されます。希釈ごとに3本のチューブに接種し、36±1℃のインキュベーターに24±2時間入れます。すべての乳糖胆汁酸塩発酵チューブがガスを生成しない場合、それは大腸菌群に対して陰性であると報告することができます。ガスが発生している場合は、以下の手順に従ってください。

3。分離培養

ガス産生発酵チューブをストリークし、エオシンメチレンブルー寒天プレートに接種し、インキュベーター内で36±1℃で18〜24時間培養しました。その後、コロニーの形態を観察し、グラム染色、顕微鏡検査、再発酵試験を実施しました。

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4。乳糖二重発酵試験

最初の乳糖発酵試験で陽性であった試験管から分離されたグラム陰性の非バチルス菌が実際に乳糖を発酵させてガスを生成できることを証明することを目的とした、いわゆる確認試験。上記の選択的EMB培地で、グラム染色のために1〜2個の疑わしい大腸菌群を選び、同時にラクトース発酵チューブに接種し、36±1°Cのインキュベーターに24±2時間入れてガスを観察します製造。 。乳糖発酵チューブがガスを生成し、グラム染色が陰性である場合、バチルスを含まない細菌は大腸菌群に対して陽性であると報告されています。乳糖発酵管がガスを発生しない、またはグラム染色が陽性の場合、大腸菌群は陰性と報告されます。

上記は、細胞培養フラスコを使用して大腸菌群の指標を検出する操作方法です。大腸菌は、食品が汚染されているかどうかを反映する重要な指標です。検出方法を習得することは、すべての食品検査官が持つべき基本的なスキルです。

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.