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Come rilevare la contaminazione da micoplasma durante la coltura di cellule nella fabbrica di cellule

Mon Dec 05 12:04:58 CST 2022

Fudau ha descritto brevemente le caratteristiche e le manifestazioni della contaminazione da micoplasma nella fabbrica di cellule in precedenza, perché se le cellule nella fabbrica di cellule sono contaminate da micoplasma, il mezzo di coltura nel cell factory non apparirà torbido in generale, allora possiamo tattraverso questi quattro metodi di rilevamento:

1. Rilevazione della contaminazione da micoplasma mediante microambiente a contrasto di fase

Mettere le cellule sospettate di essere contaminate da micoplasma nella fabbrica di cellule sul vetro di copertura in base alla specie, estrarle dopo un giorno di riposo e utilizzare una lente a olio per contrasto di fase per assistere nell'osservare lo stato delle cellule. Ho brevemente introdotto prima la forma del micoplasma. Se le cellule nella fabbrica di cellule sono contaminate dall'inquinamento da micoplasma, dopo l'osservazione si scoprirà che ci sono alcune minuscole particelle scure che fanno movimenti irregolari sulla superficie cellulare e direttamente tra le cellule.

Cell Factory

FuDau 5-Layers-Cell-Factory -TC-trattato

2. Colorazione fluorescente

Il metodo di colorazione fluorescente del DNA si basa sul principio che il colorante fluorescente bibendazolo Hoechst33258 può legarsi alla regione ricca di basi A-T nel DNA del micoplasma. Dopo aver colorato le cellule contaminate dal micoplasma, si possono vedere molte cellule di dimensioni uniformi all'esterno del nucleo e intorno alla cellula. I punti fluorescenti sono DNA di micoplasma ricco di regioni di base A-T.

3. Ispezione al microscopio elettronico

Il metodo del microscopio elettronico a scansione è semplice e veloce. Generalmente, le cellule nella fabbrica cellulare vengono coltivate per 48-72 ore. Prima che le cellule siano vicine alla confluenza, le cellule vengono digerite con tripsina per creare una sospensione cellulare, quindi fissate, incorporate e sezionate prima di poter eseguire l'osservazione.

Cell Factory

FuDau 10-Layers-Cell-Factory-TC-Treated

4. Metodi come l'ispezione del testo molecolare del DNA o la coltura del micoplasma

I suddetti sono i quattro metodi presentati per rilevare la contaminazione da micoplasma durante la coltura delle cellule nelle fabbriche di cellule. Spero che possano aiutarti.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.