Cómo transferir células criopreservadas a frascos de cultivo celular

Thu May 19 09:57:26 CST 2022

La crioconservación celular es una técnica que coloca las células en un ambiente de baja temperatura para reducir el metabolismo celular para el almacenamiento a largo plazo. Además de proteger las células, esta tecnología se usa a menudo para comprar, regalar, intercambiar y transportar ciertas células. Entonces, ¿cómo transferimos las células crioconservadas a frascos de cultivo celular?

Las células congeladas deben resucitarse antes de que se pueda llevar a cabo la siguiente operación. La resucitación de las células debe ser rápida, para que la viabilidad de las células pueda conservarse bien. La operación se puede realizar de la siguiente manera:

1. Después de recibir las celdas, compruebe si el embalaje exterior está completo; abrir el embalaje exterior y sacar las células almacenadas en hielo seco;

2. Compruebe si el tubo de crioconservación está dañado, si el contenido está derretido y coloque rápidamente el tubo de crioconservación retirado en un baño de agua a 37 ℃ para que se derrita;

3. El tubo de criopreservación se desinfecta con alcohol al 75% y se coloca en una cabina de seguridad biológica;

4. Agregue 5 ml de medio completo a un tubo de centrífuga de 15 ml para su uso;

5 Agregue la suspensión celular en el tubo de crioconservación al medio preparado y mezcle suavemente;

How to transfer cryopreserved cells to cell culture flasks

6. Coloque el tubo de centrífuga de 15 ml en la centrífuga y centrífuga a 1000 rpm/min (alrededor de 200 g) durante 3-5 min;

7. Agregue 5 ml de medio completo a un matraz de cultivo celular de 25 ml para su uso;

8. Saque las células centrifugadas, esterilícelas con alcohol y guárdelas en un gabinete seguro;

9. Aspire suavemente el sobrenadante de células centrifugadas, agregue 1 ml de medio completo para resuspender las células;

10. Agregue las células resuspendidas al matraz de cultivo celular preparado y mezcle suavemente;

11. Observe el estado y la densidad de las células inoculadas bajo un microscopio y coloque el matraz de cultivo en una incubadora a 37 °C para el cultivo.

En el proceso de recuperación celular, la fusión rápida puede garantizar que los cristales extracelulares se derritan en un período breve de tiempo, y evitar el daño a las células debido a la fusión lenta que hace que el agua penetre en las células para formar la recristalización intracelular. El frascos de cultivo celular y otros consumibles utilizados deben ser asépticos.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.