Cómo medir el número de células vivas en una fábrica de células

Thu May 19 09:57:22 CST 2022

Un cell factory es una estructura de una o varias capas de consumibles de cultivo celular. Durante el proceso de cultivo celular, debemos comprender el estado de crecimiento de las células a tiempo antes de continuar con el siguiente paso. El número de células viables puede detectarse mediante tinción con azul de tripán. El método de operación específico es el siguiente:

1. Para las células adherentes, aspire el medio, agregue la solución de digestión y digiera en la incubadora durante un tiempo apropiado. Una vez que las células se volvieron redondas, se terminó la digestión agregando un volumen de medio igual o mayor que el volumen del digestato. Después de la centrifugación, se realiza la suspensión celular con medio de cultivo;

2. Tome 0,5 ml de solución de azul tripán, 0,3 ml de PBS y 0,2 ml de suspensión celular y mezcle bien. Luego se dejó la mezcla durante 1-2 min. Utilice una pipeta capilar o una punta de pipeta pequeña de 10 ul para extraer una pequeña cantidad de la mezcla e inyectarla en el hemocitómetro;

3. Cuente al menos 1000 células y cuente el número de células teñidas;

4. Lave la placa de recuento y el cubreobjetos con agua ultrapura y etanol al 75 %;

5. Las células normales no se tiñen, solo después de que las células mueren, la permeabilidad de la membrana celular aumenta, el azul de tripano ingresa a las células y las células aparecen azules. La mezcla no debe colocarse durante demasiado tiempo, de lo contrario, las células vivas normales también absorberán el tinte, lo que afectará la precisión del conteo;

6. Viabilidad celular (%) = (número total de células - número de células teñidas)/número total de células*100;

7. Al igual que el método de recuento de células, la tinción con azul de tripano tiene un gran error. Solo puede detectar el nivel de apoptosis inicial y no puede mostrar la diferencia entre el grupo de control y el grupo experimental.

En el proceso de cultivo de células en una fábrica de células, siempre hay algunas células que mueren por diversas razones. Dominar el número de células vivas y la viabilidad celular es una operación clave en los experimentos de cultivo celular y una forma eficaz de garantizar el progreso del experimento.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.