Detección de actividad de células en fábricas de células - método MTT

Thu May 19 09:56:08 CST 2022

El cell factory es un consumible que se utiliza a menudo para el cultivo de células adherentes. Durante el experimento, necesitamos captar el estado de crecimiento de las células en tiempo real y hacer los ajustes pertinentes según la situación específica. La viabilidad celular se puede detectar mediante el método MTT para determinar el crecimiento celular.

El método MTT, también conocido como método colorimétrico MTT, es un método para detectar la supervivencia y el crecimiento celular. El principio de detección es que la succinato deshidrogenasa en la mitocondria de las células vivas puede reducir el MTT exógeno a formazán cristalino azul-púrpura insoluble en agua y depositarlo en las células, mientras que las células muertas no tienen tal función. El dimetilsulfóxido (DMSO) puede disolver el formazán en las células, y su valor de absorción de luz se puede medir mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas a una longitud de onda de 570 nm, que puede reflejar indirectamente el número de células vivas. Dentro de un cierto rango de número de celdas, la cantidad de formación de cristales de MTT es proporcional al número de celdas. Este método ha sido ampliamente utilizado en la detección de actividad de algunos factores biológicamente activos, detección de fármacos antitumorales a gran escala, prueba de citotoxicidad y ensayo de radiosensibilidad tumoral. Se caracteriza por una alta sensibilidad y economía.

Antes de probar la viabilidad de las células en la fábrica de células, un paso muy importante es la formulación de MTT. Normalmente, la concentración de MTT en este método es de 5 mg/ml. Por lo tanto, se pueden pesar 0,5 g de MTT, disolverlos en 100 ml de solución salina tamponada con fosfato (PBS) o medio sin rojo de fenol, filtrar con un filtro de 0,22 μm para eliminar las bacterias de la solución y almacenar a 4 °C en la oscuridad. . . Durante la preparación y el almacenamiento, intente envolver el recipiente con papel de aluminio.

Al usar el método MTT para medir la actividad celular en la fábrica de células, debe tenerse en cuenta que el MTT es cancerígeno, así que tenga cuidado al usarlo. Este método solo se puede utilizar para detectar el número relativo de células y la viabilidad relativa, pero no el número absoluto de células. Al probar los resultados con un lector de microplacas, para garantizar la linealidad de los resultados experimentales, la absorbancia de MTT debe estar en el rango de 0-0,7 tanto como sea posible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.