nyheder

Anvendelse af cellekulturplade i MTT-detektion

Tue Dec 06 20:30:47 CST 2022

Cellekulturpladener en slags biologisk værktøj. Den er opdelt i flad bund og rund bund efter formen. Antallet af brønde omfatter 6 brønde, 12 brønde, 24 brønde, 48 ​​brønde, 96 brønde, 384 brønde osv. Den bruges hovedsageligt til cellekultur og kan også bruges til at måle proteinkoncentration, 96-brønds plader bruges almindeligvis til MTT-detektion.

MTT-metoden, også kendt som MTT-kolorimetrisk metode, er en metode til påvisning af celleoverlevelse og -vækst. Detektionsprincippet er, at succinatdehydrogenasen i mitokondrierne i levende celler kan reducere den eksogene MTT til vanduopløselig blå-lilla krystalformazan (Formazan) og deponere den i cellerne, mens døde celler ikke har en sådan funktion. Dimethylsulfoxid (DMSO) kan opløse formazan i celler, og dets lysabsorptionsværdi måles ved 570 nm med et enzymbundet immunassay, som indirekte kan afspejle antallet af levende celler. Inden for et vist område af celletal er mængden af ​​MTT-krystaldannelse proportional med antallet af celler. Registreringstrinene er som følger:

1. Dyrk cellerne i en 96-brønds cellekulturplade. Efter at celletætheden er passende, tilsæt 50 ul MTT til hver brønd og fortsæt med at dyrke i 4 timer;

2. Sug dyrkningsmediet, der indeholder MTT, væk, og tilsæt 150 ul DMSO. Vibrer vandret i 10 minutter for helt at opløse krystallerne. For suspenderede celler, efter centrifugering, sug mediet væk, og tilsæt derefter DMSO for at opløse;

3. Mål absorbansen ved 550 nm på det enzymforbundne immunoassay-instrument (indstil en rimelig kontrolgruppe og blank gruppe);

4. Celleoverlevelsesrate=absorptionsværdi for forsøgsgruppe/absorbansværdi for kontrolgruppe*100%.

Det skal bemærkes under operationen, at MTT er kræftfremkaldende. Hvis det er muligt, så prøv at bære den slags gennemsigtige filmhandsker. Den forberedte MTT skal være steril. MTT er meget følsomt over for bakterier. Det er lige meget, om du tilføjer til cellekulturpladen med 96 brønde uden at beskytte den mod lys. , Tiden er trods alt kort, eller du kan slukke for belysningen på konsollen.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.